Питательные среды для бактериологической лаборатории
Питательные среды в разделе - в основном сухие порошки для приготовления плотных и жидких сред, многие производства Оболенска в упаковках по 250 г. С ними работают лаборатории СЭС, водоканалов, пищевых и фармацевтических предприятий, ветеринарные и клинические лаборатории: сеют пробы воды и продуктов, выделяют и идентифицируют бактерии, контролируют стерильность. Сухая форма удобна тем, что порошок хранится дольше готовых сред и позволяет готовить ровно тот объём, который нужен на день посевов.
Какие среды есть и для чего они нужны
По назначению позиции делятся на универсальные, дифференциально-диагностические, элективные среды и компоненты для собственных рецептур.
Универсальные
Мясопептонный агар (МПА) и ГРМ-агар на гидролизате рыбной муки - плотные среды для выращивания нетребовательных бактерий, накопления биомассы и поддержания чистых культур. С добавлением крови или углеводов на их основе готовят обогащённые среды.
Дифференциально-диагностические
Агар Эндо разделяет энтеробактерии по ферментации лактозы: лактозоположительные колонии окрашиваются в красный цвет. Среды Гисса с глюкозой, лактозой, маннитом и ксилозой составляют «пёстрый ряд» - по смене цвета индикатора и газообразованию видно, какие углеводы сбраживает культура.
Элективные и специальные
Среды Кесслера и Кода применяют для выявления бактерий группы кишечной палочки (БГКП), агар Сабуро - для дрожжей и плесневых грибов, среду Вильсон-Блера - для сульфитредуцирующих клостридий. Менингоагар нужен для менингококков, щелочной агар - для вибрионов, тиогликолевая среда - для контроля стерильности, плазма кроличья цитратная - для теста на плазмокоагулазу стафилококков. Для культур клеток есть среда альфа-МЕМ во флаконах по 500 мл.
Компоненты
Пептон ферментативный, дрожжевой экстракт, агар-агар и забуференная пептонная вода для неселективного накопления бактерий. Из них собирают среды по прописям методик, когда нужной сухой среды нет.
Как приготовить питательную среду из сухого порошка
Навеску в граммах на литр берут из инструкции изготовителя: у каждой среды она своя. Порошок растворяют в дистиллированной воде, кипятят до полного расплавления агара и стерилизуют в режиме из той же инструкции. Агаровая среда застывает примерно при 40 °C, поэтому в чашки Петри и пробирки её разливают горячей.
Каждую приготовленную партию проверяют на стерильность, выдерживая часть чашек в термостате, и на ростовые свойства тест-штаммами - порядок контроля описывает МУК 4.2.2316-08. В пищевой микробиологии среда Кесслера входит в ГОСТ 31747-2012 по выявлению колиформных бактерий.
Хранение сухих сред
Сухая питательная среда гигроскопична: банку закрывают сразу после взятия навески и хранят в сухом месте, защищённом от света. Температуру хранения и срок годности смотрят на этикетке - у разных изготовителей они отличаются. Слежавшийся комками или изменивший цвет порошок в работу не берут.
В соседних разделах - красители для окраски мазков по Граму и стеклянные чашки Петри. Среды можно забрать самовывозом со склада в Актобе, по Казахстану работает доставка.
Часто задаваемые вопросы
-
Оба - универсальные плотные среды для нетребовательных бактерий. МПА готовят на мясной основе с пептоном, ГРМ-агар - на гидролизате рыбной муки.
-
Для изучения биохимических свойств бактерий: если культура сбраживает углевод, индикатор в среде меняет цвет. В разделе есть среды с глюкозой, лактозой, маннитом и ксилозой.
-
Бактерии группы кишечной палочки (колиформы) в воде и пищевых продуктах. Признак положительного результата - помутнение среды и газ в поплавке.
-
1,5-2 % для плотных сред и 0,3-0,7 % для полужидких. В сухие агаровые среды, например МПА, Эндо или Сабуро, агар уже входит, его не добавляют.
-
Для коагулазного теста: патогенные стафилококки, в первую очередь Staphylococcus aureus, свёртывают плазму, и это один из признаков при их идентификации.
